الهدف هو دراسة التغيرات في أيض الأحماض الدهنية وتأثيرها في نموذج تلف الكلى الناتج عن حمض الفوليك ونموذج اعتلال الكلى السكري (DN). الطريقة هي إنشاء نموذج تلف الكلى الناتج عن حمض الفوليك عن طريق حقن حمض الفوليك داخل الصفاق. تم تقسيم 9 فئران C57BL/6J البالغة عشوائياً إلى مجموعتين: مجموعة التحكم المالحة (Saline، n=5) ومجموعة التدخل بحمض الفوليك (FA، n=4). حصلت مجموعة FA على حقنة داخل الصفاق بجرعة 250 ملغ/كغ من حمض الفوليك مرة واحدة، بينما حصلت مجموعة Saline على حقنة بمقدار مماثل من محلول ملحي. تم إنشاء نموذج DN بواسطة نظام غذائي عالي الدهون مع حقن ستربتوزوتوسين. تم اختيار 11 فأرًا C57BL/6J بالغًا وتقسيمهم عشوائياً إلى مجموعتين: مجموعة التحكم الغذائية العادية (ND، n=6) ومجموعة النموذج (DN، n=5). مجموعة ND تم تغذيتها على الغذاء العادي طوال الوقت؛ أما مجموعة DN فقد تم تغذيتها على غذاء عالي الدهون لمدة 8 أسابيع، ثم تلقت حقنة واحدة داخل الصفاق من الستربتوزوتوسين بجرعة 100 ملغ/كغ، واستمر تغذيتها على الغذاء عالي الدهون حتى الأسبوع 16. (1) لوحظت التغيرات المرضية في كلى الفئران الأربع باستخدام صبغة HE وصبغة Sirius Red. (2) تم تحليل RNA-Seq لأنسجة الكلى للفئران، وتم اختيار الجينات المعبر عنها بشكل مختلف (DEGs) وإجراء تحليلات GO وKEGG وGSEA. تم قياس مستويات mRNA للجينات المرتبطة بتخليق الأحماض الدهنية والتليف باستخدام RT-qPCR؛ وأعدت أقسام مجمدة من الكلى لصبغة Oil Red O لتقييم تراكم القطرات الدهنية. (3) تم تحليل مستوى mRNA لجينات تخليق الأحماض الدهنية والجينات المرتبطة بالتليف في خلايا أنابيب الكلى القشرية القريبة البشرية (HK-2)، المعالجة بـ 10 ng/mL من TGF-β1 المعاد تركيبه أو تحت ظروف ارتفاع السكر، باستخدام RT-qPCR؛ واستخدمت صبغة Bodipy 493/503 لتقييم تراكم القطرات الدهنية في خلايا HK-2 وخلايا أنابيب الكلى الأولية (PTECs) التي تمت معالجتها بالمثل. (4) تم تقييم تراكم القطرات الدهنية في خلايا HK-2 المعالجة بـ 100 ميكرومول/لتر من حمض البالمتيك (PA) باستخدام صبغة Bodipy 493/503. (5) تم تقييم تقدم الشيخوخة في أنسجة الكلى للفئران الأربع باستخدام صبغة SA-β-gal. كما تم تقييم الشيخوخة والتعبير عن عوامل الحالة المفرزة المرتبطة بالشيخوخة في خلايا HK-2 المعالجة بـ PA باستخدام SA-β-gal، التحليل الغربي و RT-qPCR؛ وتم تحليل تأثير معالجة PTECs بـ PA على تنشيط الخلايا الليفية الكلوية باستخدام التصوير المناعي للفلور. النتائج (1) ظهرت تغيرات مرضية في بنية الأنابيب الكلوية وترسيب الألياف الكولاجينية في أنسجة الكلى لمجموعتي FA و DN. (2) تم إثراء الجينات المعبر عنها بشكل مختلف في مجموعتي FA و DN في المسارات المتعلقة بالأيض، خاصة مسارات أيض الدهون. مقارنة بمجموعة Saline، كانت جينات تخليق الأحماض الدهنية Srebp1 و Fasn في مجموعة FA مرتفعة بشكل ملحوظ (Srebp1: t=2.445، P=0.0444؛ Fasn: t=2.571، P=0.0370)؛ مقارنة بمجموعة ND، كانت تعبيرات جينات Srebp1 و Acc1 و Fasn في مجموعة DN مرتفعة (Srebp1: t=3.354، P=0.0100؛ Acc1: t=2.602، P=0.0315؛ Fasn: t=2.358، P=0.0461). جين Col1a1 المرتبط بالتليف كان مرتفع التعبير في كلتا المجموعتين FA و DN (FA: t=2.628، P=0.0340؛ DN: t=3.602، P=0.0070)، ترافق ذلك مع تراكم الدهون. (3) في خلايا HK-2 المعالجة بـ TGF-β1 أو في ظروف ارتفاع السكر، زادت مستويات mRNA لجينات SREBP1 (F=15.41، P=0.0043؛ TGFβ: P=0.0029؛ HG: P=0.0452)، ACC1 (F=30.30، P=0.0007؛ HG: P=0.0014) و FASN (F=18.76، P=0.0026؛ TGFβ: P=0.0017؛ HG: P=0.0310)، مع تحفيز تراكم الدهون في خلايا HK-2 و PTECs. (4) زاد عدد الخلايا المسنّة في كلى مجموعتي FA و DN، كما أن معالجة PA يمكن أن تحفز تراكم الدهون في خلايا أنابيب الكلى وتسريع الشيخوخة وتنشيط الخلايا الليفية. الخلاصة أن التعبير عن جينات أيض الدهون في كلى نماذج اعتلال الكلى بسبب حمض الفوليك ومرض السكري كان معطّلًا؛ الإفراط في تخليق الأحماض الدهنية يؤدي إلى تراكم الدهون، وتحفيز شيخوخة خلايا PTECs، ما يعزز تطور التليف.

اعتلال الكلى الناجم عن حمض الفوليك;اعتلال الكلى السكري;استقلاب الأحماض الدهنية;تراكم الدهون;شيخوخة الخلايا;التليف