الهدف هو فرز وتحديد البروتينات الرئيسية التي تنظم إشارة جسم الالتهاب NLRP3 المرتبط بمجال البروتين الشبيه بمستقبلات NOD في فيروس جدري القردة (MPXV). الطريقة: باستخدام جينوم السلالة السائدة محليًا من MPXV كنموذج، تم بناء مكتبة بلازميدات تعبر عن الجينات الفيروسية المحتملة ذات الوظائف التنظيمية للالتهاب (82 بلازميدًا). تم موازنة التعبير للتعبير البروتيني الحقيقي للنيوكليوبروتين NLRP3، ومُرتبط التبرعم المتعلق بالموت الخلوي ASC، والكاسبيز-1، ومسبّق إنترلوكين-1β مع تقرير اللوسيفيراز (pro-IL-1β-Luc) مع بلازميدات تعبير الجينات الفيروسية في خلايا HEK293T. تم مراقبة تفعيل مسار إشارة الجسم الالتهابي NLRP3 عن طريق قياس نشاط اللوسيفيراز في وسط الخلايا، مما سمح بفرز الجينات الفيروسية التي تثبط بشكل واضح إنتاج IL-1β الناضج. تم تحديد وظيفة التثبيط باستخدام طرق Western blot (WB) وتم التحقق من التفاعل مع مكونات الجسم الالتهابي NLRP3 عبر التمبُر المناعي المشترك (Co-IP). كما تم تحديد نمط التفاعل بواسطة تحوير مواقع محددة. النتائج: تم بناء وتحسين نظام الفرز لإشارة الجسم الالتهابي NLRP3. باستخدام هذا النظام، تم فرز مكتبة بلازميدات تعبير MPXV، حيث أظهر B10R أكبر تثبيط لإنتاج IL-1β الناضج (P < 0.0001) مع تأثير يعتمد على الجرعة. تم تحديد أن B10R يتفاعل مع pro-IL-1β، بينما فقد الطفرات في الطرف C من B10Rmut-C (T96A, Y97A, I98A) القدرة على التفاعل مع pro-IL-1β. الاستنتاج: يمكن لبروتين MPXV B10R التفاعل مع pro-IL-1β لتثبيط إنتاج IL-1β الناضج، ويعتبر نمط النهاية C من B10R (T96, Y97, I98) حاسمًا لوظيفته. توفر هذه الدراسة أدلة وفهمًا أكبر لآلية تنظيم MPXV لإشارة الجسم الالتهابي NLRP3.

NOD-شبيه مستقبلات مجال البروتين الحراري المرتبط بـ NLRP3; الجسم الالتهابي; فيروس جدري القردة; إنترلوكين-1β; B10R