فقدان Lss في المستقبلات الضوئية يسبب التنكُّس الشبكي المرتبط بالعمر عبر خلل وظيفي في الميتوكوندريا وتأكسد إجهادي
摘要
تهدف الدراسة إلى استكشاف ما إذا كان الحذف النوعي لإنزيم تخليق اللامسترول (Lss) في المستقبلات الضوئية يسبب التنكُّس الشبكي المرتبط بالعمر وآليات عمله. تم إنشاء نموذج فأر لحذف Lss الخاص بالمستقبل الضوئي (Lss^flox/flox؛ Rho-Cre، CKO)، وتم تقييم هيكل ووظيفة الشبكية في أعمار 1، 4، و8 أشهر باستخدام تصوير قاع العين، تصوير الطبقات البصرية المقطعية، تخطيط الشبكية الكهربائي للتكيف الظلامي (ERG)، وصبغة HE. استخدمت خلايا مستقبلات ضوئية شبكية الفأر 661W كنموذج في المختبر، وتم خفض تعبير Lss بواسطة siRNA، مع اختبارات ضغط الميتوكوندريا Seahorse XF، تلوين JC-1، صبغة MitoSOX Red، ومستشعر DCFH-DA لتقييم وظيفة الميتوكوندريا والتأكسد الإجهادي، اختبار معدل تحلل الجلوكوز، RT-qPCR للكشف عن عوامل الالتهاب، وتلوين مناعي لـγH2AX للكشف عن تلف الحمض النووي مزدوج الشريط؛ كما تم تحليل التعبير الجيني تفريقي ومسارات الإثراء بعد خفض تعبير Lss بواسطة التسلسل الشامل للنسخ. لم تُشاهد شذوذات عند الفئران CKO بعمر شهر واحد مقارنة بالمجموعة الضابطة؛ لوحظت تغيرات طفيفة في قاع العين عند عمر 4 أشهر؛ وعند 8 أشهر لوحظ ترقق كبير في الطبقة النووية الخارجية للشبكية، واضطراب في هيكل الأجزاء الداخلية والخارجية، مع انخفاض ملحوظ في أمواج ERG a وb (P<0.05). أظهر التحليل الجيني 1842 جيناً معبرًا عنها بشكل مختلف (826 مرفوع، 1016 مخفض)، وكان Lss أقل الجينات تعبيرًا بشكل كبير، مع إثراء واضح لمسارات تخليق السترول، الفسفرة المؤكسدة، سلسلة التنفس الهوائية، وتكوين ATP الميتوكوندري (P<0.05). بعد خفض Lss في خلايا 661W، انخفض الاستهلاك الأساسي للأكسجين للميتوكندريا (P=0.006)، إنتاج ATP (P=0.015)، الاستهلاك الأقصى (P<0.001)، والقدرة الاحتياطية (P<0.001)، بينما ارتفع معدل تحلل الجلوكوز الأساسي (P=0.005) ومستوى التحلل التراكمي (P=0.028)، مع فقدان استقطاب غشاء الميتوكوندريا (P<0.001)، وارتفاع في ROS الميتوكندريا (P<0.001) ومستوى ROS الكلي (P=0.013)، كما زاد التعبير الجيني لعوامل الالتهاب Ccl2 (P=0.004)، Ccl5 (P=0.012)، Cxcl1 (P<0.001)، Cxcl5 (P<0.0001)، Tgfb (P=0.008)، Hgf (P<0.0001)، وMmp3 (P=0.003)، مع زيادة شدة تلوين γH2AX (P=0.002). توصلت الدراسة إلى أن فقدان Lss في المستقبلات الضوئية يؤدي إلى التنكُّس الشبكي المرتبط بالعمر عن طريق التسبب في خلل وظيفي في الميتوكوندريا، تأكسد إجهادي، واستجابة التهابية، مما يمدنا بآليات وأهداف علاجية جديدة للأمراض التنكسية الشبكية الجينية والمرتبطة بالعمر.
关键词
إنزيم تخليق اللامسترول;المستقبلات الضوئية;أمراض تنكسية شبكية;خلل وظيفي في الميتوكوندريا;تأكسد إجهادي
以上内容由讯飞翻译自动生成，翻译内容仅供参考。对于因使用本网站翻译内容产生的相关后果，本网站不承担任何商业和法律责任。
The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website