Ziel der Studie war es, die Expression des familiären Mitglieds 162A mit sequenziellem Ähnlichkeitsprofil des Proteins der inneren Mitochondrienmembran (Fam162a) bei Myokardfibrose und seine Rolle bei der Regulation des fibrotischen Phänotyps der kardialen Fibroblasten zu untersuchen. Myokardproben von Patienten mit Herzinsuffizienz (HF) und Myokardgewebe von Mäusen mit durch Aortenstenose (TAC) induzierter kardialer Umgestaltung wurden verwendet, um die Expression von Fam162a zu bestimmen. Primäre Neugeborenen-kardiale Fibroblasten (mCFs) wurden isoliert und kultiviert, und ein Zellmodell der Myokardfibrose wurde durch Angiotensin II (Ang II) induziert, um die Expression von Fam162a zu messen. Gastrointestinale Adenoviren wurden verwendet, um Fam162a in mCFs zu überexprimieren, und mittels siRNA wurde Fam162a in mCFs herunterreguliert. Mit Western Blot wurden fibrosebezogene Proteine (einschließlich COL1A1, COL3A1, α-SMA) nachgewiesen, Zellproliferation mittels EdU-Färbung bewertet, Zellmigration durch Kratz- und Transwell-Assays untersucht, mitochondriales Membranpotenzial (TMRE) durch Immunfluoreszenz detektiert, Gesamt- und mitochondriale reaktive Sauerstoffspezies (ROS) in lebenden Zellen gemessen sowie ATP-Level zur Spiegelung des zellulären Energiestoffwechsels bestimmt. Die Western-Blot-Ergebnisse zeigten eine signifikante Erhöhung der Expression von COL1A1, COL3A1 und α-SMA im Myokard von HF-Patienten, TAC-Mäusen und Ang-II-behandelten mCFs, während die Expression von Fam162a signifikant abnahm (p < 0,05). Die Überexpression von Fam162a hemmte signifikant die durch Ang II induzierte Expression fibrosebezogener Gene sowie die Proliferation und Migration von mCFs, während der siRNA-vermittelte Knockdown von Fam162a den durch Ang II induzierten fibrotischen Phänotyp von mCFs verschärfte. Weitere Untersuchungen zeigten, dass nach Zugabe des mitochondrialen Respirationsketteninhibitors Rotenon (Rotenone) die hemmende Wirkung der Überexpression von Fam162a auf den fibrotischen Phänotyp der durch Ang II induzierten mCFs unterdrückt wurde, begleitet von einem Abfall des mitochondrialen Membranpotenzials, vermehrter ROS-Bildung und unzureichender ATP-Synthese. Fazit: Fam162a hemmt den fibrotischen Phänotyp kardialer Fibroblasten, indem es das mitochondriale Membranpotenzial aufrechterhält, die ATP-Produktion fördert, die ROS-Produktion und die Smad3-Signalaktivierung verringert.

Familie 162 mit Sequenzähnlichkeit;Myokardfibrose;kardiale Fibroblasten;Mitochondrienfunktion;oxidative Phosphorylierung