Anwendung neuer umweltfreundlicher Reagenzien in der pathologischen Präparation und Immunhistochemie

LI Jieying ,  

LIANG Shujun ,  

DING Ying ,  

LIU Shuying ,  

QIN Lina ,  

PAN Zhaoliang ,  

FENG Lianqiang ,  

YUAN Huijie ,  

摘要

Ziel ist die Untersuchung der Wirksamkeit umweltfreundlicher Reagenzien im Vergleich zu traditionellen Reagenzien bei der Gewebeverarbeitung, Gewebeschnitt, Hämatoxylin-Eosin (HE)-Färbung, Spezialfärbungen und Immunhistochemie. Methode: Es wurden Bauchspeicheldrüse, Niere, Milz, Leber, Lunge, Skelettmuskulatur und Herzgewebe von Mäusen und Neuseeländischen Kaninchen ausgewählt und zufällig in die traditionelle Gruppe (Gruppe A), umweltfreundliche Reagenzgruppe I (Gruppe B) und umweltfreundliche Reagenzgruppe II (Gruppe C) eingeteilt. Nach der Gewebeverarbeitung in den drei Gruppen wurden Paraffinschnitte, HE-Färbungen, Phosphotungstichämatoxylin-Färbungen, Mallory-Dreifachfärbungen durchgeführt, und Bauchspeicheldrüsenschnitte wurden immunhistochemisch zur Detektion von Insulinprotein untersucht. Bewertet wurden Gewebemorphologie, Einbettungsfähigkeit, Schnittqualität und Färbeeffekt. Ergebnisse: Zwischen den drei Gruppen gab es keine signifikanten Unterschiede bei Fixierung, Einbettung und Schnittqualität. Nach HE-Färbung waren Zellkerne und Zytoplasma in allen Gruppen hell gefärbt und kontrastreich, mit guten Raten von 98 % (Gruppe A), 99 % (Gruppe B) und 97 % (Gruppe C), ohne statistisch signifikante Unterschiede (A vs. B, P=0,561; A vs. C, P=0,651). Bei der Phosphotungstichämatoxylin-Färbung waren die quer gestreifte Muskulatur und Kollagenfasern in den Gruppen A und C klar und intensiv gefärbt, während Gruppe B eine ungleichmäßige Färbung aufwies. Gute Raten betrugen 100 % für Gruppe A, 10 % für Gruppe B und 95 % für Gruppe C, mit signifikanter Differenz zwischen A und B (P<0,01), aber nicht zwischen A und C (P=0,311). Bei der Mallory-Dreifachfärbung zeigten die Gruppen A und B bessere Ergebnisse als Gruppe C. Gute Raten lagen bei 95 % (Gruppe A), 90 % (Gruppe B) und 15 % (Gruppe C), mit signifikanter Differenz zwischen A und C (P<0,01), aber keiner zwischen A und B (P=0,548). Immunhistochemische Ergebnisse zeigten, dass Gruppe A einen sauberen Hintergrund ohne unspezifische Färbung hatte, während B und C deutliche unspezifische Färbungen zeigten; der Unterschied im unspezifischen Färbungsanteil zwischen den Gruppen war statistisch signifikant (A vs. B, 5 % vs. 100 %, P<0,01; A vs. C, 5 % vs. 100 %, P<0,01). Fazit: Bei HE-Präparaten zeigten umweltfreundliche Reagenzien eine gute Gewebefixierung und vergleichbare HE-Färbeergebnisse zu traditionellen Reagenzien und erfüllen die Anforderungen in der Lehre. Bei Spezialfärbungen zeigten Gruppe B und C jeweils bessere Leistungen bei Mallory-Dreifachfärbung und Phosphotungstichämatoxylin-Färbung. Umweltfreundliche Reagenzien zeigen jedoch unspezifische Probleme in der Immunhistochemie, die weiter optimiert werden müssen.

关键词

Umweltfreundliche Reagenzien; Paraffinschnitte; HE-Färbung; Spezialfärbungen; Immunhistochemie

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