Ziel der Studie ist es, die immunregulatorische Wirkung von Gallussäure (GA) und ihren molekularen Mechanismus in von BCG (Bacillus Calmette-Guérin) infizierten Makrophagen zu untersuchen, um eine experimentelle Grundlage für die wirtorientierte antituberkulöse Forschung gegen Mycobacterium tuberculosis zu schaffen. Die Methylenblau-Färbemethode wurde verwendet, um die minimale Hemmkonzentration (MIC) von GA gegen BCG zu bestimmen, zusammen mit Bakterienwachstumskurven und MTT-Test zur Bewertung der Wirkung von GA auf Proliferation und Invasivität von BCG. Ein RAW264.7-Makrophagenmodell, infiziert mit BCG, wurde erstellt, einschließlich Kontrollgruppe (Ctrl), Isoniazidgruppe (INH) sowie niedrige, mittlere und hohe GA-Dosierungsgruppen. Durchflusszytometrie kombiniert mit Plattierungszählung wurde zur Erfassung des intrazellulären Überlebens von BCG verwendet; AnnexinV-APC/7-AAD-Doppelanfärbung zur Erkennung der Apoptose; qRT-PCR zur Messung der mRNA-Expression der apoptosebezogenen Gene Caspase-3 und Bcl-2; Durchflusszytometrie zur Bestimmung des Makrophagen-Polarisationsphänotyps; DHE-Sonde zur Erkennung von intrazellulären reaktiven Sauerstoffspezies (ROS); Griess-Methode zur Bestimmung von Stickstoffmonoxid (NO) im Überstand; ELISA zur Messung der Zytokinspiegel TNF-α, IFN-γ, IL-6, IL-10 im Überstand. Die Ergebnisse zeigten, dass die MIC von GA gegen BCG 1250 μmol/L beträgt und GA die Proliferation und Invasion von BCG konzentrationsabhängig hemmt (P<0,05); sichere Medikamentenkonzentrationen von 20, 40, 80 μmol/L wurden für Zellversuche ausgewählt, eine 36-stündige GA-Vorbehandlung verringerte signifikant die intrazelluläre BCG-Bakterienlast (P<0,05). GA reguliert die Apoptose von Makrophagen bidirektional, hemmt die Apoptose in der frühen Infektionsphase und fördert sie in der späten; induziert die M1-Polarisation in der frühen Infektionsphase und fördert die M2-Polarisation in der späten Phase (P<0,05); senkt gleichzeitig intrazelluläre ROS- und NO-Spiegel, reduziert die Sekretion proinflammatorischer Faktoren und erhöht die Sekretion des antiinflammatorischen Faktors IL-10 (P<0,05). Fazit: GA kann in vitro die Proliferation und Invasion von BCG hemmen; und durch die bidirektionale Regulation von Makrophagen-Apoptose und -Polarisation antioxidative und antiinflammatorische Effekte ausüben, das Immunmikroumfeld des Wirts verbessern und besitzt somit ein potenzielles therapeutisches Potenzial für wirtorientierte antimikrobielle Therapie.

Gallussäure;BCG;Makrophagen;Immunfunktion;antimikrobielle Wirkung