L'objectif est d'étudier les modifications du métabolisme des acides gras et leurs effets dans les modèles de lésions rénales induites par l'acide folique et la néphropathie diabétique (DN). Méthodes : un modèle de lésions rénales induites par l'acide folique a été établi par injection intrapéritonéale d'acide folique. Neuf souris adultes C57BL/6J ont été réparties aléatoirement en deux groupes : groupe contrôle saline (Saline, n=5) et groupe intervention avec acide folique (FA, n=4). Les souris du groupe FA ont reçu une injection intrapéritonéale unique d'acide folique (250 mg/kg), tandis que le groupe Saline a reçu un volume équivalent de solution saline. Le modèle DN a été créé par alimentation riche en lipides combinée à une injection de streptozotocine. Onze souris adultes C57BL/6J ont été réparties en deux groupes : groupe contrôle (ND, n=6) et groupe modèle (DN, n=5). Le groupe ND a reçu une alimentation normale pendant toute la durée, tandis que le groupe DN a été nourri avec un régime riche en lipides pendant 8 semaines, suivi d'une injection intrapéritonéale unique de streptozotocine (100 mg/kg), puis a continué à recevoir un régime riche en lipides jusqu'à la semaine 16. (1) Les modifications pathologiques des reins des quatre groupes de souris ont été observées par coloration HE et Sirius Red. (2) Les tissus rénaux des souris ont été analysés par RNA-Seq pour identifier les gènes différemment exprimés (DEGs), avec analyses GO, KEGG et GSEA. Le niveau d’ARNm des gènes de synthèse des acides gras et des gènes liés à la fibrose a été mesuré par RT-qPCR; des coupes rénales congelées ont été préparées pour la coloration Oil Red O afin d’évaluer l’accumulation de gouttelettes lipidiques. (3) Les niveaux d’ARNm des gènes de synthèse des acides gras et des gènes liés à la fibrose ont été analysés par RT-qPCR dans les cellules épithéliales proximales du cortex rénal humain (HK-2) traitées avec 10 ng/mL de TGF-β1 recombinant ou cultivées en conditions hyperglycémiques ; l’accumulation lipidique dans les cellules HK-2 et les cellules épithéliales tubulaires proximales primaires (PTECs) traitées de la même manière a été évaluée par coloration Bodipy 493/503. (4) L’accumulation de gouttelettes lipidiques dans les cellules HK-2 traitées avec 100 µmol/L d’acide palmitique (PA) a été évaluée par coloration Bodipy 493/503. (5) Le vieillissement dans les tissus rénaux des quatre groupes a été détecté par coloration SA-β-gal. Le vieillissement et l’expression des facteurs phénotypiques sécrétoires associés au vieillissement dans les cellules HK-2 traitées au PA ont été évalués par coloration SA-β-gal, Western blot et RT-qPCR; l’impact du traitement PA sur l’activation des fibroblastes rénaux dans les PTECs a été analysé par immunofluorescence. Résultats : (1) Les tissus rénaux des groupes FA et DN présentaient des lésions de la structure tubulaire rénale et des dépôts de fibres de collagène. (2) Les gènes différentiellement exprimés dans les groupes FA et DN étaient enrichis dans les voies métaboliques, en particulier celles liées au métabolisme lipidique. Par rapport au groupe Saline, l’expression des gènes de synthèse des acides gras Srebp1 et Fasn était significativement augmentée dans le groupe FA (Srebp1 : t=2,445, P=0,0444 ; Fasn : t=2,571, P=0,0370) ; par rapport au groupe ND, l’expression de Srebp1, Acc1 et Fasn était augmentée dans le groupe DN (Srebp1 : t=3,354, P=0,0100 ; Acc1 : t=2,602, P=0,0315 ; Fasn : t=2,358, P=0,0461). Le gène lié à la fibrose Col1a1 était sur-exprimé dans les groupes FA et DN (FA : t=2,628, P=0,0340 ; DN : t=3,602, P=0,0070), accompagné d’une accumulation lipidique. (3) Dans les cellules HK-2 traitées par TGF-β1 ou en conditions hyperglycémiques, les niveaux d’ARNm des gènes SREBP1 (F=15,41, P=0,0043 ; groupe TGFβ : P=0,0029 ; groupe HG : P=0,0452), ACC1 (F=30,30, P=0,0007 ; groupe HG : P=0,0014) et FASN (F=18,76, P=0,0026 ; groupe TGFβ : P=0,0017 ; groupe HG : P=0,0310) étaient significativement augmentés, induisant une accumulation lipidique dans les cellules HK-2 et PTECs. (4) Le nombre de cellules sénescentes augmentait dans les reins des groupes FA et DN, et le traitement par PA favorisait l’accumulation lipidique dans les cellules tubulaires rénales, accélérant le vieillissement cellulaire et l’activation des fibroblastes. Conclusion : la transcription des gènes liés au métabolisme lipidique dans les reins des modèles de néphropathie folique et diabétique est anormale ; la synthèse excessive d’acides gras entraîne une accumulation lipidique, induit le vieillissement des PTECs et favorise le développement de la fibrose.

Néphropathie folique ; Néphropathie diabétique ; Métabolisme des acides gras ; Accumulation lipidique ; Vieillissement cellulaire ; Fibrose