Application de nouveaux réactifs écologiques en histologie pathologique et immunohistochimie

LI Jieying ,  

LIANG Shujun ,  

DING Ying ,  

LIU Shuying ,  

QIN Lina ,  

PAN Zhaoliang ,  

FENG Lianqiang ,  

YUAN Huijie ,  

摘要

Objectif d'étudier l'effet d'application des réactifs écologiques par rapport aux réactifs traditionnels dans le traitement des tissus, la coupe des tissus, la coloration à l'hématoxyline-éosine (HE), les colorations spéciales et l'immunohistochimie. Méthodes : Des tissus de pancréas, rein, rate, foie, poumon, muscle squelettique et cœur de souris et lapins de Nouvelle-Zélande ont été sélectionnés et répartis aléatoirement en groupe traditionnel (groupe A), groupe réactif écologique I (groupe B) et groupe réactif écologique II (groupe C). Après traitement des tissus dans les trois groupes, des coupes en paraffine, une coloration HE, une coloration à l'hématoxyline phosphotungstique, une coloration triple de Mallory ont été réalisées ; les coupes du pancréas ont été soumises à une immunohistochimie pour détecter la protéine insuline. Les critères d'évaluation comprenaient : l'intégrité morphologique des tissus, la maniabilité de l'enrobage, la qualité des coupes et l'efficacité de la coloration. Résultats : Aucun écart significatif entre les trois groupes concernant la fixation, l'enrobage et la qualité des coupes. Après coloration HE, les noyaux et le cytoplasme étaient bien colorés avec un contraste net dans tous les groupes, les taux d'excellence étaient respectivement de 98 % pour le groupe A, 99 % pour B et 97 % pour C, sans différence statistique significative (A vs B, P=0,561 ; A vs C, P=0,651). Dans la coloration à l'hématoxyline phosphotungstique, les fibres musculaires striées et les fibres de collagène étaient nettes et bien colorées dans les groupes A et C, tandis que le groupe B présentait une coloration inégale. Le taux d'excellence était de 100 % pour le groupe A, 10 % pour B, 95 % pour C ; la différence entre A et B était significative (P<0,01), celle entre A et C non significative (P=0,311). Dans la coloration triple de Mallory, les groupes A et B ont eu de meilleurs résultats que C. Les taux d'excellence étaient 95 % pour A, 90 % pour B, 15 % pour C ; la différence entre A et C était significative (P<0,01), celle entre A et B non significative (P=0,548). Les résultats d'immunohistochimie montraient un fond propre sans coloration non spécifique dans le groupe A, tandis que B et C montraient une coloration non spécifique évidente, avec une différence significative entre les groupes (A vs B, 5 % vs 100 %, P<0,01 ; A vs C, 5 % vs 100 %, P<0,01). Conclusion : Dans la préparation des coupes HE, le réactif écologique fixe bien les tissus et la coloration HE est comparable à celle du réactif traditionnel, répondant aux besoins pédagogiques. Dans les colorations spéciales, les groupes B et C ont mieux performé respectivement dans la coloration triple de Mallory et la coloration à l'hématoxyline phosphotungstique. Toutefois, les réactifs écologiques présentent des problèmes de coloration non spécifique en immunohistochimie, nécessitant une optimisation ultérieure.

关键词

Réactifs écologiques;coupes paraffine;coloration HE;colorations spéciales;immunohistochimie

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