L'objectif est d'étudier le rôle régulateur immunitaire de l'acide gallique (GA) dans les macrophages infectés par le vaccin BCG (Bacille Calmette-Guérin) ainsi que ses mécanismes moléculaires, afin de fournir une base expérimentale pour la recherche sur la lutte antituberculeuse dirigée vers l'hôte. La concentration minimale inhibitrice (CMI) de la GA contre le BCG a été déterminée par la méthode de coloration au bleu de trypan, combinée à la courbe de croissance bactérienne et à la méthode colorimétrique MTT pour évaluer l'impact de la GA sur la prolifération et l'invasion du BCG. Un modèle de macrophages RAW264.7 infectés par le BCG a été établi, avec un groupe témoin infecté (Ctrl), un groupe isoniazide (INH) et des groupes GA à faible, moyenne et forte dose. La survie intracellulaire du BCG a été mesurée par cytométrie en flux combinée au comptage sur plaque bactérienne ; l'apoptose cellulaire a été détectée par double coloration AnnexinV-APC/7-AAD, l'expression des gènes apoptotiques Caspase-3 et Bcl-2 a été évaluée par qRT-PCR ; la polarisation des macrophages a été analysée par cytométrie en flux ; les espèces réactives de l'oxygène intracellulaire (ROS) ont été évaluées par sonde DHE ; le monoxyde d'azote (NO) dans le surnageant a été mesuré par la méthode de Griess ; et les niveaux des cytokines TNF-α, IFN-γ, IL-6, IL-10 ont été quantifiés par ELISA. Les résultats indiquent que la CMI de GA contre BCG est de 1250 μmol/L et que GA inhibe la prolifération et l'invasion du BCG de manière dépendante de la concentration (P < 0.05) ; des concentrations sûres de 20, 40 et 80 μmol/L ont été choisies pour les expériences cellulaires, le prétraitement par GA pendant 36 h réduit significativement la charge bactérienne intracellulaire (P < 0.05). GA régule l'apoptose des macrophages de manière bidirectionnelle, inhibant l'apoptose au début de l'infection et la favorisant en phases ultérieures ; induit la polarisation M1 au début de l'infection et la polarisation M2 en phase tardive (P < 0.05) ; réduit simultanément les niveaux de ROS et NO intracellulaires, diminue la sécrétion des facteurs pro-inflammatoires et augmente celle de la cytokine anti-inflammatoire IL-10 (P < 0.05). En conclusion, GA inhibe in vitro la prolifération et l'invasion du BCG ; en régulant bidirectionnellement l'apoptose et la polarisation des macrophages, il exerce des effets antioxydants et anti-inflammatoires, améliorant le microenvironnement immunitaire de l'hôte, ce qui lui confère un potentiel en tant qu'agent anti-mycobactérien orienté vers l'hôte.

acide gallique;vaccin BCG;macrophages;fonction immunitaire;effet anti-mycobactérien