Цель исследования — изучить роль галловой кислоты (GA) в регуляции иммунитета хозяина в макрофагах, инфицированных вакциной БЦЖ (BCG), и молекулярные механизмы этого процесса, чтобы предоставить экспериментальные основания для исследований противотуберкулезной терапии, направленной на хозяина. Методом окрашивания короткозеленым определяли минимальную ингибирующую концентрацию (MIC) GA против BCG, сочетая с кривой роста бактерий и цветовой реакцией MTT для оценки влияния GA на размножение и инвазивность BCG. Создана модель RAW264.7 макрофагов, инфицированных BCG, с контрольной группой (Ctrl), группой изониазида (INH) и группами GA низкой, средней и высокой дозы. Использовали проточную цитометрию в сочетании с подсчетом колоний для определения выживания BCG внутри клеток; двухцветное окрашивание AnnexinV-APC/7-AAD для оценки апоптоза; qRT-PCR для измерения экспрессии мРНК апоптотических генов Caspase-3 и Bcl-2; проточную цитометрию для оценки фенотипа поляризации макрофагов; зонд DHE для определения внутриклеточного активного кислорода (ROS); методом Гриесса для определения окиси азота (NO) в супернатанте; ELISA для определения уровней цитокинов TNF-α, IFN-γ, IL-6, IL-10. Результаты показали, что MIC GA против BCG составляет 1250 мкмоль/л, при этом GA ингибирует размножение и инвазию BCG в концентрационно-зависимом режиме (P < 0,05); были выбраны безопасные концентрации 20, 40, 80 мкмоль/л для клеточных экспериментов, предобработка GA в течение 36 часов значительно снижала внутриклеточную нагрузку BCG (P < 0,05). GA регулирует апоптоз макрофагов двунаправленно: подавляет апоптоз на ранних этапах инфекции, способствует на поздних; стимулирует поляризацию M1 на ранних стадиях инфекции и поляризацию M2 на поздних (P < 0,05); одновременно снижает уровень внутриклеточного ROS и NO, подавляет секретирование провоспалительных факторов и повышает секрецию противовоспалительного IL-10 (P < 0,05). Вывод: GA в пробирке ингибирует размножение и инвазию BCG, путем двунаправленной регуляции апоптоза и поляризации макрофагов оказывает антиоксидантное и противовоспалительное действие, улучшая иммунную микроокружение хозяина, обладает потенциалом как средство, направленное на хозяина для борьбы с микобактериями.

галловая кислота;вакцина БЦЖ;макрофаги;иммунная функция;противомикобактериальное действие