Цель исследования — изучить роль галловой кислоты (GA) в регуляции иммунного ответа хозяина и ее молекулярный механизм в макрофагах, инфицированных вакциной БЦЖ (BCG), с целью предоставления экспериментальной основы для исследований, нацеленных на хозяина, касающихся противотуберкулезного действия по отношению к Mycobacterium tuberculosis. Методом окрашивания метиленовым синим определяли минимальную ингибирующую концентрацию (MIC) GA против BCG, совместно с кривыми роста бактерий и тестом MTT оценивали влияние GA на размножение и инвазивность BCG. В модели RAW264.7 макрофагов, инфицированных BCG, были установлены контрольная группа (Ctrl), группа изониазида (INH) и низкие, средние и высокие дозы GA. Использовалась проточная цитометрия совместно с подсчетом колоний для определения выживаемости BCG внутри клеток; двуцветное окрашивание AnnexinV-APC/7-AAD для оценки апоптоза клеток; qRT-PCR для анализа экспрессии мРНК генов, связанных с апоптозом, Caspase-3 и Bcl-2; проточная цитометрия для определения фенотипа поляризации макрофагов; зонд DHE для обнаружения внутриклеточного активного кислорода (ROS); метод Грийсса для определения уровня оксида азота (NO) в супернатанте; ELISA для измерения уровней цитокинов TNF-α, IFN-γ, IL-6, IL-10. Результаты показали, что MIC GA против BCG составляет 1250 мкмоль/л и GA подавляет пролиферацию и инвазию BCG зависимо от концентрации (P<0,05); были выбраны безопасные концентрации препарата 20, 40, 80 мкмоль/л для клеточных экспериментов, предварительная обработка GA в течение 36 часов значительно снижала количество внутриклеточного BCG (P<0,05). GA двунаправленно регуляцирует апоптоз макрофагов: подавляет апоптоз на ранней стадии инфекции и способствует апоптозу на поздней; индуцирует М1-поляризацию на ранней стадии и способствует М2-поляризации на поздней стадии инфекции (P<0,05); одновременно снижает уровни ROS и NO внутри клеток, уменьшает секрецию провоспалительных факторов и повышает секрецию противовоспалительного IL-10 (P<0,05). Вывод: GA in vitro подавляет пролиферацию и инвазию BCG; посредством двунаправленной регуляции апоптоза и поляризации макрофагов оказывает антиоксидантное и противовоспалительное действие, улучшая иммунный микроклимат хозяина и обладая потенциалом для направленной на хозяина противотуберкулезной терапии.

галловая кислота;вакцина БЦЖ;макрофаги;иммунная функция;противотуберкулезное действие