Целью является изучение молекулярного механизма устойчивости дремлющих клеток рака яичников (OC), опосредованного молекулой NR2F1, к химиотерапевтическим препаратам. Методом была использована база данных GEPIA для анализа экспрессии молекулы NR2F1 у пациентов с OC и её связи с общей выживаемостью пациентов; in vitro с использованием лентивирусной трансфекции были созданы линии клеток OC с сверхэкспрессией ядерного рецептора подсемейства 2 группы F1 (NR2F1) и контрольные клетки; пролиферация клеток OC измерялась с помощью набора CCK-8; уровни экспрессии мРНК молекул, связанных с дремотой, в клетках OC определялись с помощью количественной ПЦР в реальном времени (qRT-PCR); уровни белков анализировались методом вестерн-блоттинга; жизнеспособность клеток OC при воздействии различных химиопрепаратов оценивалась методом исключения голубого трапана; уровень апоптоза при лечении разными химиопрепаратами оценивался с помощью проточной цитометрии с двумя красителями Annexin V-FITC/PI; для анализа линии клеток SKOV3 с сверхэкспрессией NR2F1 применялась технология транскриптомного секвенирования, а KEGG-анализ обогащения выявил степень накопления дифференциально экспрессируемых генов в соответствующих сигнальных путях; уровни мРНК генов, связанных с резистентностью, в клетках OC проверялись методом qRT-PCR; корреляция экспрессии NR2F1 с экспрессией различных генов, связанных с резистентностью, дополнительно проверялась на базе данных GEPIA. Результаты показали, что у пациентов с OC молекула NR2F1 экспрессируется на низком уровне в первичных опухолевых тканях, при этом у пациентов с высокой экспрессией NR2F1 общая выживаемость была короче. По сравнению с контролем, у клеточных линий OC с сверхэкспрессией NR2F1 значительно снижалась пролиферация, повышалась экспрессия молекул, связанных с сном, таких как ингибитор циклин-зависимой киназы 1B (p27), дифференцированный эмбриональный ген хряща-2 (DEC2), фактор роста трансформирующий β2 (TGF-β2) и антиапоптотический ген B-клеточной лимфомы-2 (BCL-2), при этом экспрессия молекулы, связанной с пролиферацией, KI67, снижалась. Клеточные линии OC с сверхэкспрессией NR2F1 демонстрировали значительно повышенную устойчивость к химиотерапии. Результаты транскриптомного секвенирования и KEGG-анализа показали, что дифференциально регулируемые гены дремлющих OC-клеток, опосредованных NR2F1, обогащены в сигнальных путях PI3K-Akt, фокальных контактах, взаимодействии рецептора с внеклеточным матриксом и регуляции плюрипотентности стволовых клеток, в то время как дифференциально пониженные гены обогащены в путях цикла клетки. Результаты qRT-PCR показали, что гены, связанные с резистентностью, такие как член семейства драйверных белков 26B (KIF26B), секретируемый кислый богатый цистеином белок (SPARC), коллаген VI α1-цепь (COL6A1), коллаген V α2-цепь (COL5A2), фреклютиносвязанный рецептор 1 (FZD1) и ингибирующий субъединицу β A (INHBA) были повышены в клетках OC с сверхэкспрессией NR2F1. Анализ корреляций на базе данных GEPIA показал положительную связь между экспрессией NR2F1 и резистентных генов KIF26B, SPARC, COL6A1, COL5A2, FZD1 и INHBA в опухолевых тканях OC. Заключение: исследование показывает, что активация сигнального пути NR2F1 может индуцировать дремоту клеток OC и регулировать резистентность к химиопрепаратам; механизм резистентности дремлющих OC-клеток, опосредованных NR2F1, вероятно, включает сигнальные пути PI3K-Akt и регуляции плюрипотентности стволовых клеток, а также тесно связан с повышенной экспрессией резистентных молекул KIF26B, SPARC, COL6A1, COL5A2, FZD1 и INHBA.

дремота; ядерный рецептор подсемейства 2 группы F1; рак яичников; химиотерапевтические препараты; резистентность