El objetivo es investigar el papel regulador de la respuesta inmune del ácido gálico (GA) en macrófagos infectados con BCG (Bacilo Calmette-Guérin) y sus mecanismos moleculares, proporcionando una base experimental para la investigación sobre el tratamiento antituberculoso dirigido al hospedador. Se utilizó el método de tinción con azul de metileno para determinar la concentración mínima inhibitoria (CMI) de GA contra BCG, junto con la curva de crecimiento bacteriano y la prueba colorimétrica MTT para evaluar el efecto de GA sobre la proliferación e invasión de BCG. Se construyó un modelo de macrófagos RAW264.7 infectados con BCG, con grupos control infectado (Ctrl), isoniazida (INH) y grupos de GA en dosis bajas, medias y altas. Se detectó la supervivencia intracelular de BCG mediante citometría de flujo y recuento en placa bacteriana; la apoptosis celular se evaluó mediante doble tinción AnnexinV-APC/7-AAD; la expresión de los genes relacionados con la apoptosis Caspase-3 y Bcl-2 se midió por qRT-PCR; se estudió la polarización de macrófagos por citometría de flujo; la ROS intracelular se detectó con la sonda DHE; el óxido nítrico (NO) en sobrenadante se midió con el método de Griess; y los niveles de citocinas TNF-α, IFN-γ, IL-6, IL-10 se cuantificaron por ELISA. Los resultados mostraron que la CMI de GA contra BCG es de 1250 μmol/L, y que GA inhibe la proliferación e invasión de BCG de forma dependiente de la concentración (P < 0.05); se seleccionaron concentraciones seguras de 20, 40 y 80 μmol/L para los experimentos celulares, y el pretratamiento con GA durante 36 h disminuyó significativamente la carga bacteriana intracelular (P < 0.05). GA regula la apoptosis de macrófagos de manera bidireccional, inhibiendo la apoptosis en etapas tempranas de la infección y promoviendo la apoptosis en etapas tardías; induce polarización M1 en etapas tempranas y polarización M2 en etapas tardías de la infección (P < 0.05); reduce simultáneamente los niveles intracelulares de ROS y NO, disminuye la secreción de factores proinflamatorios y aumenta la secreción del factor antiinflamatorio IL-10 (P < 0.05). En conclusión, GA inhibe in vitro la proliferación e invasión de BCG; y mediante la regulación bidireccional de la apoptosis y la polarización de macrófagos, ejerce efectos antioxidantes y antiinflamatorios, mejorando el microentorno inmune del hospedador, lo que le otorga un potencial como agente antimitobacacteriano dirigido al hospedador.

ácido gálico;BCG;macrófagos;función inmunitaria;efecto antimicobacteriano