El objetivo es investigar el papel regulador inmunológico del ácido gálico (GA) y su mecanismo molecular en macrófagos infectados con el bacilo de Calmette-Guérin (BCG), para proporcionar una base experimental para la investigación dirigida al huésped contra Mycobacterium tuberculosis. Se utilizó el método de coloración con azul de metileno para determinar la concentración mínima inhibitoria (MIC) de GA contra BCG, junto con curvas de crecimiento bacteriano y el ensayo MTT para evaluar el efecto de GA en la proliferación e invasión de BCG. Se estableció un modelo de células RAW264.7 infectadas con BCG, configurando grupos control (Ctrl), isoniazida (INH), y dosis bajas, medias y altas de GA. Se usó citometría de flujo combinada con el recuento en placa para detectar la supervivencia intracelular de BCG; tinción doble AnnexinV-APC/7-AAD para detectar apoptosis celular; qRT-PCR para evaluar la expresión de los genes relacionados con la apoptosis Caspase-3 y Bcl-2; citometría de flujo para detectar el fenotipo de polarización de macrófagos; la sonda DHE para detectar especies reactivas de oxígeno intracelulares (ROS); el método Griess para medir óxido nítrico (NO) en el sobrenadante; ELISA para detectar niveles de citocinas TNF-α, IFN-γ, IL-6, IL-10 en el sobrenadante. Los resultados mostraron que la MIC de GA contra BCG fue de 1250 μmol/L, pudiendo inhibir la proliferación e invasión de BCG de forma dependiente de concentración (P<0.05); se seleccionaron concentraciones seguras de 20, 40, 80 μmol/L para los experimentos celulares, el pretratamiento con GA durante 36 h redujo significativamente la carga bacteriana intracelular de BCG (P<0.05). GA regula bidireccionalmente la apoptosis de macrófagos, inhibiendo la apoptosis en la fase temprana de la infección y promoviendo la apoptosis en la fase tardía; induciendo la polarización M1 en la fase temprana y promoviendo la polarización M2 en la fase tardía (P<0.05); al mismo tiempo reduce los niveles intracelulares de ROS y NO, disminuye la secreción de factores proinflamatorios y aumenta la secreción del factor antiinflamatorio IL-10 (P<0.05). Conclusión: GA puede inhibir in vitro la proliferación e invasión de BCG; y a través de la regulación bidireccional de la apoptosis y polarización de macrófagos, ejerce un efecto antioxidante y antiinflamatorio, mejorando el microambiente inmunológico del huésped, con un valor potencial como agente anti-micobacteriano dirigido al huésped.

ácido gálico;BCG;macrófagos;función inmune;acción antimicobacteriana