【目的】 优化双向凝胶电泳的实验步骤

总结出一套适用于原发性肝癌组织的双向凝胶电泳技术65377;【方法】 对双向电泳实验中的关键环节:样本处理65380;上样方法65380;聚焦条件等进行研究与优化

考马斯亮蓝染色后进行凝胶图像比较65377; 【结果】 采用7 mmol /L尿素65380;2 mol /L硫脲65380;40 g/L CHAPS65380;100 mmol /L DTT65380;5 g/L (pH 3-10) IPG buffer

1 mmol /L PMSF作为裂解液

丙酮沉淀蛋白

主动水化上样法

聚焦电压达到140 kV可以得到分辨率高65380;重复性好的结果65377; 【结论】 上述改良提高了2-D图谱中蛋白位点的分辨率和重复性

为原发性肝癌组织的蛋白质组学研究奠定了基础65377;