AFP启动子介导胸苷激酶表达载体的构建及其特异性表达

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更新时间：2023-12-12

- AFP启动子介导胸苷激酶表达载体的构建及其特异性表达
- Recombined and Construction of Human Alpha-fetoprotein Eukaryotic Expression Vector Plasmid pEGFP-C1-AFP-TK
- 中山大学学报（医学科学版） 2009年30卷第5期
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：
  中图分类号： R735.7
- 网络首发：2009-09-20，
  
  纸质出版：2009
- 稿件说明：
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AFP启动子介导胸苷激酶表达载体的构建及其特异性表达[J]. 中山大学学报（医学科学版）, 2009,30(5).

Recombined and Construction of Human Alpha-fetoprotein Eukaryotic Expression Vector Plasmid pEGFP-C1-AFP-TK[J]. Journal of Sun Yat-sen University (Medical Sciences), 2009, 30(5).
AFP启动子介导胸苷激酶表达载体的构建及其特异性表达[J]. 中山大学学报（医学科学版）, 2009,30(5). DOI：

Recombined and Construction of Human Alpha-fetoprotein Eukaryotic Expression Vector Plasmid pEGFP-C1-AFP-TK[J]. Journal of Sun Yat-sen University (Medical Sciences), 2009, 30(5). DOI：

【目的】构建AFP启动子介导HSV-TK基因表达载体

并对其在肝癌细胞中特异性表达进行分析. 【方法】采用PCR法扩增人AFP基因启动子?回收纯化后克隆入pBluescript II KDR-TK相同克隆位点

切取AFP-TK片段

然后通过酶联反应插入到pEGFP-C1中

构建成pEGFP-C1-AFP-TK、对获得的片段进行鉴定、细胞靶向和外源基因表达的鉴定。【结果】序列分析表明

该启动子含300 bp核苷酸

与已报道的序列比较

100%相符。限制性酶切分析

重组质粒pEGFP-C1-AFP-TK已经克隆AFP启动子。RT-PCR及Western blotting分析pEGFP-C1-AFP-TK转染后的HepG2细胞后

表明TK基因在mRNA水平上能有效的表达

裂解后的HepG2细胞膜蛋白中有相对分子质量约61 ~ 83 ku大小的特异性条带。【结论】人肝细胞癌(HepG2)靶向性质粒pEGFP-C1-AFP-TK构建成功。

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