【目的】 研究体外培养骨髓来源的表达nestin的成年大鼠骨髓间质干细胞(MSC)并诱导分化神经元样细胞的潜能

为中枢神经系统疾病的细胞移植治疗提供理想的供体65377;【方法】 采用全骨髓法分离培养成年SD大鼠MSC

传至第6代的MSC接种在前一天涂有100 μg/L多聚赖氨酸的塑料培养瓶或培养皿中

用含100 mL/L FBS的DMEM/F12培养液添加10 ng/mL bFGF的培养液培养并以DMSO65380;BHA与Forskolin等诱导剂联合诱导MSC分化为神经元65377;流式细胞仪鉴定诱导前MSC的细胞表面抗原

免疫荧光检测诱导前及诱导后6 h65380;12 h65380;24 h神经元特异性抗原nestin65380;NF*9鄄200和GFAP表达率65377; 【结果】 流式细胞仪检测传至第6代MSC表面抗原CD29和CD44阳性率分为98.8%

96.6%

CD34和CD45阴性65377; 免疫荧光鉴定传至第6代的MSC表达nestin阳性率为57.1% ± 6.9%

不表达NF*9鄄200和GFAP65377;诱导后30 min可见神经元样细胞出现

诱导后6 h65380;12 h65380;24 h经nestin和NF*9鄄200免疫荧光鉴定

诱导后6 h65380;12 h65380;24 h nestin阳性率分别为96.5% ± 1.9%

88.1% ± 5.4%

33.5% ± 5.4%

NF*9鄄200阳性率分别为90.1% ± 2.9%

97.5% ± 1.3%

98.1% ± 1.6%65377;【结论】 骨髓来源的nestin阳性的MSC具有神经祖细胞特性并且可诱导分化为神经元样细胞

可作为种子细胞用于神经系统疾病的治疗65377;