应用 GFP质粒构建及转染技术探讨Syk(L)核移位机制

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更新时间：2023-12-08

- 应用 GFP质粒构建及转染技术探讨Syk(L)核移位机制
- Using GFP Constructs Making and Transfection Technology to Explore Mechanism of Syk(L) Nuclear Translocation
- 中山大学学报（医学科学版） 2006年27卷第6期
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  中图分类号：
- 网络首发：2006-11-20，
  
  纸质出版：2006
- 稿件说明：
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宋新明, 汪建平. 应用 GFP质粒构建及转染技术探讨Syk(L)核移位机制[J]. 中山大学学报（医学科学版）, 2006,27(6).

Using GFP Constructs Making and Transfection Technology to Explore Mechanism of Syk(L) Nuclear Translocation[J]. Journal of Sun Yat-sen University (Medical Sciences), 2006, 27(6).
宋新明, 汪建平. 应用 GFP质粒构建及转染技术探讨Syk(L)核移位机制[J]. 中山大学学报（医学科学版）, 2006,27(6). DOI：

Using GFP Constructs Making and Transfection Technology to Explore Mechanism of Syk(L) Nuclear Translocation[J]. Journal of Sun Yat-sen University (Medical Sciences), 2006, 27(6). DOI：

【目的】通过研究 Syk(L)在乳腺癌细胞亚细胞器中的分布和移位机制

探讨 Syk(L)抑制乳腺癌的可能性机制。【方法】采用细胞胞核、胞浆分离技术和 Western blot 的方法

检测乳腺癌细胞系 BT474 中两种Syk 蛋白异构体在细胞内的分布。构建绿色荧光蛋白( GFP) 和 Syk(L)核移位相关功能域融合蛋白质粒

转染入Cos 7 细胞内

荧光显微镜下观察融合蛋白在细胞内的分布。【结果】 BT474 细胞的细胞浆中可检测到 Syk(S)和 Syk(L)的表达

细胞核中只检测到 Syk(L)的表达。在 Cos 7 细胞中

GFP 与 Syk(L)的缺失域( deletion domain

DEL 域) 融合蛋白均匀分布于细胞内

GFP 与 Syk(L)的 IDB 域融合蛋白聚集于细胞核中; 将DEL 域上的 294K、 300K、及 305K 突变域非碱性氨基酸后构建成 GFP- IDB(L)- M

突变的融合蛋白则失去核聚集现象。【结论】在乳腺癌细胞中

Syk(L)可从细胞胞浆移位到细胞核内。Syk(L)的 IDB 域具有完整的核移位功能

能将融合的胞浆蛋白 GFP 转移到细胞核内; DEL 域的碱性氨基酸具有核定位信号功能。Syk(L)在乳腺癌细胞中的抑癌功能与其核移位有关。

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