大鼠BDNF基因复制缺陷型重组腺病毒的构建与鉴定

王鹏; 吴燕峰; 黄文林; 唐勇; 黄霖; 杨睿; 沈慧勇

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大鼠BDNF基因复制缺陷型重组腺病毒的构建与鉴定

更新时间：2023-12-11

- 大鼠BDNF基因复制缺陷型重组腺病毒的构建与鉴定
- Construction and Identification of Replication-deficient Recombinant Adenovirus Cloned with a SD Rat BDNF Gene
- 中山大学学报（医学科学版） 2006年27卷第2期
- 作者机构：
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- DOI：
  中图分类号： R342.3
- 网络首发：2006-03-20，
  
  纸质出版：2006
- 稿件说明：
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王鹏, 吴燕峰, 黄文林, 等. 大鼠BDNF基因复制缺陷型重组腺病毒的构建与鉴定[J]. 中山大学学报（医学科学版）, 2006,27(2).

Construction and Identification of Replication-deficient Recombinant Adenovirus Cloned with a SD Rat BDNF Gene[J]. Journal of Sun Yat-sen University (Medical Sciences), 2006, 27(2).
王鹏, 吴燕峰, 黄文林, 等. 大鼠BDNF基因复制缺陷型重组腺病毒的构建与鉴定[J]. 中山大学学报（医学科学版）, 2006,27(2). DOI：

Construction and Identification of Replication-deficient Recombinant Adenovirus Cloned with a SD Rat BDNF Gene[J]. Journal of Sun Yat-sen University (Medical Sciences), 2006, 27(2). DOI：

摘要

【目的】构建携带大鼠脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）目的基因的复制缺陷型重组腺病毒，并初步检测其体外表达目的基因的能力。【方法】提取大鼠脑组织总RNA，使用RT—PCR方法扩增BDNF目的基因并将其克隆入pMD18-T Simple载体测序，将测序完全正确的BDNF目的基因克隆入pShuttle2中，然后利用体外连接法将BDNF目的基因克隆入Adeno—X^TM腺病毒骨架中。Lipofectamine^TM 2000法转染HEK293细胞包装携带BDNF目的基因的重组腺病毒，少量提取重组腺病毒DNA检测证实为复制缺陷型BDNF基因重组腺病毒后大量扩增。蛋白电泳及Western blot法初步检测BDNF目的基因在HEK293细胞中的表达。【结果】成功构建了携带大鼠BDNF目的基因的复制缺陷型重组腺病毒。并证实其在HEK293细胞中可高水平表达BDNF目的基因。【结论】利用体外连接法可方便、快捷地构建携带BDNF目的基因的复制缺陷型重组腺病毒，并可在体外高水平表达表达其所携带的目的基因。

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