【目的】探讨瞳孔状态对光学相干断层扫描仪（OCT3）测量视网膜神经纤维层（RNFL）厚度值的影响及其诊断青光眼的准确性。【方法】正常人38例72眼，原发性开角型青光眼患者19例34眼，分别在自然瞳孔（2．5～3mm）和药物散瞳下（6～8mm）用OCT3成组扫描程序（RNFL Thickness3．4）进行检查。对散瞳前后各象限RNFL厚度及全周平均值进行对比，分别计算散瞳前后RNFL厚度测量值的ROC曲线下面积。【结果】正常人散瞳前颞侧、上方、鼻侧、下方、平均的RNFL厚度（μm）分别为77±12、122±16、68±13、125±16、98±9，散瞳后相应的RNFL厚度分别是75±13、122±17、71±13、125±14、98±10，散瞳前后比较，除鼻侧外（P为0．039），其余象限及全周RNFL厚度差异无显著性（P为0．478～0．870）。原发性开角型青光眼患者散瞳前颞侧、上方、鼻侧、下方、平均的RNFL厚度（μm）分别为63±13、90±20、58±15、72±22、71±9，散瞳后相应的RNFL厚度分别是65±13、93±22、60±12、74±22、73±10，散瞳前后颞侧和全周RNFL厚度平均值差异有显著性（P分别为0．011、0．008），其余各方位差异无显著性（P为0．109～0．172）。散瞳前后平均及下方视网膜神经纤维层厚度测量值的ROC曲线下面积最大，为0．971～0．983。【结论】应用OCT3测量RNFL厚度，瞳孔大小对测量值影响不大，但瞳孔不能小于2．5mm，屈光间质混浊时应散瞳检查。自然瞳孔及散瞳下运用OCT3测量RNFL厚度诊断青光眼的准确性高，结果可靠。