腺病毒载体介导的大鼠DNA 多聚酶β重组体的构建及其在PC12 细胞中的表达

钟建辉

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腺病毒载体介导的大鼠DNA 多聚酶β重组体的构建及其在PC12 细胞中的表达

更新时间：2023-12-12

- 腺病毒载体介导的大鼠DNA 多聚酶β重组体的构建及其在PC12 细胞中的表达
- Construction of Recombinant Adenovirus Containing Rat DNA Polymerase β and Its Expression in PC12 Cells
- 中山大学学报（医学科学版） 2005年26卷第6期
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  中图分类号：
- 网络首发：2005-11-20，
  
  纸质出版：2005
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钟建辉. 腺病毒载体介导的大鼠DNA 多聚酶β重组体的构建及其在PC12 细胞中的表达[J]. 中山大学学报（医学科学版）, 2005,26(6).

Construction of Recombinant Adenovirus Containing Rat DNA Polymerase β and Its Expression in PC12 Cells[J]. Journal of Sun Yat-sen University (Medical Sciences), 2005, 26(6).
钟建辉. 腺病毒载体介导的大鼠DNA 多聚酶β重组体的构建及其在PC12 细胞中的表达[J]. 中山大学学报（医学科学版）, 2005,26(6). DOI：

Construction of Recombinant Adenovirus Containing Rat DNA Polymerase β and Its Expression in PC12 Cells[J]. Journal of Sun Yat-sen University (Medical Sciences), 2005, 26(6). DOI：

摘要

【目的】为探讨DNA多聚酶β在神经细胞损伤中的作用与机制，构建其重组腺病毒载体，并在PC12细胞中表达。【方法】RT-PCR获取大鼠DNA多聚酶β(POLβ)的编码序列，TA克隆测序，酶切POLβ基因并连入穿梭质粒pAdTrack-CMV，电转至含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183。重组腺病毒质粒(pAd-polβ)和Lipofectamine2000转染293细胞，用重组腺病毒感染PC12细胞。【结果】10个TA克隆中有3个克隆的序列与GENE BANK中大鼠POLβ cDNA序列完全一致，同源重组检测时30个克隆中有8个含目标条带。DNA序列正确的POLβ重组腺病毒质粒转染293细胞后，感染Ad-polβ的293及PC12细胞荧光显微镜下可见绿色荧光，重组腺病毒Ad-polβPCR鉴定含目标条带，Ad-polβ感染PC12细胞Western Blot检测到POLβ蛋白表达。【结论】成功构建了大鼠DNA多聚酶β的腺病毒重组体并在PC12细胞中表达

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