小鼠端粒酶蛋白亚单位重组腺病毒载体的构建及鉴定

姜楠; 陆敏强; 李华; 蔡常洁; 杨扬; 许赤; 冯炼强; 陈规划

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小鼠端粒酶蛋白亚单位重组腺病毒载体的构建及鉴定

更新时间：2023-12-12

- 小鼠端粒酶蛋白亚单位重组腺病毒载体的构建及鉴定
- Construction and Identification of Mouse Telomerase Reverse Transcriptase Recombinant Adenovirus Vector
- 中山大学学报（医学科学版） 2006年27卷第1期
- 作者机构：
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- 基金信息：
- DOI：
  中图分类号： R363
- 网络首发：2006-01-20，
  
  纸质出版：2006
- 稿件说明：
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姜楠, 陆敏强, 李华, 等. 小鼠端粒酶蛋白亚单位重组腺病毒载体的构建及鉴定[J]. 中山大学学报（医学科学版）, 2006,27(1).

Construction and Identification of Mouse Telomerase Reverse Transcriptase Recombinant Adenovirus Vector[J]. Journal of Sun Yat-sen University (Medical Sciences), 2006, 27(1).
姜楠, 陆敏强, 李华, 等. 小鼠端粒酶蛋白亚单位重组腺病毒载体的构建及鉴定[J]. 中山大学学报（医学科学版）, 2006,27(1). DOI：

Construction and Identification of Mouse Telomerase Reverse Transcriptase Recombinant Adenovirus Vector[J]. Journal of Sun Yat-sen University (Medical Sciences), 2006, 27(1). DOI：

摘要

【目的】构建小鼠端粒酶蛋白亚单位（mouse telomerase reverse transcriptase，mTERT）基因重组腺病毒载体，为下一步研究其体外表达和动物实验研究提供基础。【方法】从肝癌细胞中提取总RNA。采用RT-PER技术扩增mTERT的基因编码区序列，将序列定向克隆至真核表达载体pAC，将此表达质粒与腺病毒重组质粒pJM17共同转染293细胞，经同源重组产生重组腺病毒载体Ad-mTERT，纯化后的重组腺病毒载体Ad-mTERT在293细胞大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化，测定病毒滴度。【结果】PCR及酶切证实：mTERTDNA正确克隆到穿梭质粒pAC中，带mTERTDNA的表达盒成功重组到腺病毒载体基因组E1A缺失区，并在293细胞中成功包装出具有感染活性的重组腺病毒Ad-mTERT。【结论】成功构建了小鼠TERT基因重组腺病毒载体，为研究其用于肿瘤的基因治疗奠定基础。

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