人BLyS 基因克隆、表达和抗人BLyS 单克隆抗体的制备

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更新时间：2023-12-12

- 人BLyS 基因克隆、表达和抗人BLyS 单克隆抗体的制备
- Molecular Cloning , Expression of hBLyS and Preparation of Anti-hBLyS Monoclonal Antibody
- 中山大学学报（医学科学版） 2002年23卷第3期
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：
  中图分类号： R392.11
- 网络首发：2002-05-20，
  
  纸质出版：2002
- 稿件说明：
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张志方. 人BLyS 基因克隆、表达和抗人BLyS 单克隆抗体的制备[J]. 中山大学学报（医学科学版）, 2002,23(3).

Molecular Cloning , Expression of hBLyS and Preparation of Anti-hBLyS Monoclonal Antibody[J]. Journal of Sun Yat-sen University (Medical Sciences), 2002, 23(3).
张志方. 人BLyS 基因克隆、表达和抗人BLyS 单克隆抗体的制备[J]. 中山大学学报（医学科学版）, 2002,23(3). DOI：

Molecular Cloning , Expression of hBLyS and Preparation of Anti-hBLyS Monoclonal Antibody[J]. Journal of Sun Yat-sen University (Medical Sciences), 2002, 23(3). DOI：

【目的】研制抗人BLyS 单克隆抗体

以进一步探讨人BLyS 与自身免疫性疾病的关系。【方法】将人BLy S 基因克隆到融合蛋白原核表达载体pGEX-4T-1 中

构建重组质粒pGEX-4T-1/hBLyS

用此重组质粒转化大肠杆菌BL21

加IPTG 诱导大肠杆菌表达GST-hBLy S 融合蛋白

用此融合蛋白免疫BALB/c 鼠

取鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合

用ELISA 法筛选阳性克隆

用免疫印迹和流式细胞仪进一步鉴定抗体的特异性。【结果】重组质粒双酶切结果和DNA 序列测定以及表达蛋白 SDS-PAGE 电泳结果表明

pGEX-4T-1/ hBLyS 重组质粒可以正确表达GST-hBLyS 融合蛋白;ELISA 、免疫印迹和流式细胞仪检测结果表明

1c6 杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体可以特异性结合人T 淋巴细胞膜表面BLyS 的膜外区

属于IgG2b 亚类。【结论】所获得的单克隆抗体具有能够结合人T 淋巴细胞上的BLyS 特异性

可用于研究人BLyS 与自身免疫性疾病的关系。

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