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(中山医科大学孙逸仙纪念医院神经科, ),广东,广州,510120
网络首发:2001-11-20,
纸质出版:2001
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刘 军, 邢诒刚, 梁秀龄, 等. 人芳香族氨基酸脱羧酶基因的克隆及测序[J]. 中山大学学报(医学科学版), 2001,22(6).
Cloning and Sequencing of Human-l-aromatic-amino Acid Decarboxylase Gene[J]. Journal of Sun Yat-sen University (Medical Sciences), 2001, 22(6).
刘 军, 邢诒刚, 梁秀龄, 等. 人芳香族氨基酸脱羧酶基因的克隆及测序[J]. 中山大学学报(医学科学版), 2001,22(6). DOI:
Cloning and Sequencing of Human-l-aromatic-amino Acid Decarboxylase Gene[J]. Journal of Sun Yat-sen University (Medical Sciences), 2001, 22(6). DOI:
【目的】用RT-PCR 法获得人类神经元性芳香族氨基酸脱羧酶(AADC)基因全序列
并建立优化方法。【方法】 从人嗜铬细胞瘤中提取组织总RNA
自行设计引物
采用两步RT-PCR 法扩增出长约1 550 bp 的基因片断
凝胶回收后与高 效克隆PCR 产物的新型载体T-载体连接
并转化入大肠杆菌
通过蓝白斑反应筛选出重组体
质粒提取后进行重组体的酶切 鉴定及基因测序。【结果】BamH Ⅰ 和Hin dⅢ 酶切证实了目的基因同克隆载体进行了有效的连接
基因测序证实了所克隆的 片断为人AADC 基因。【结论】本实验通过对引物
Taq 酶的选择及反应条件的优化
保证了扩增的有效性和特异性。新型 的克隆载体明显提高了克隆效率。基因测序证实了AADC 基因扩增的成功。本研究为AADC 基因治疗帕金森病等多巴胺能 缺乏疾病的研究打下了基础。
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