【目的】 建立体外诱导骨髓间质干细胞分化的平滑肌细胞模型

探索骨髓间质干细胞分化的平滑肌细胞在动脉粥样硬化发生发展过程中的作用65377;【方法】采用贴壁法从SD大鼠骨髓中分离骨髓间质干细胞(BMSC)

运用条件培养基诱导BMSC分化成平滑肌细胞(SMC)

采用免疫荧光法分析骨髓间质干细胞及其分化后的细胞特异性标志物65377;羟脯氨酸测定法检测两种细胞合成细胞外基质能力

粘附和迁移实验检测两种细胞的粘附和迁移能力65377;【结果】 ①分离的BMSC呈长梭形

呈骨髓间质干细胞表型65377;经条件培养基诱导分化15 d后

诱导分化的细胞形态呈梭形平滑肌样65377;表达平滑肌细胞特异性蛋白标志物α-肌动蛋白(α-SMC)和平滑肌肌球蛋白重链1(SM-MHC1)

呈平滑肌细胞表型

命名为骨髓间质干细胞分化的平滑肌细胞(BMSC-SMC)65377;②羟脯氨酸测定结果显示

未处理BMSC-SMC合成较高量的胶原

其合成量低于VSMC的合成量

经80 mg/L ox-LDL处理72 h后

BMSC-SMC合成胶原的能力显著降低(P < 0.01)65377;③细胞粘附实验结果发现

未处理BMSC-SMC有中等数量的细胞发生粘附

经80 mg/L ox-LDL处理1 h后

BMSC-SMC细胞粘附的数目少量增加

但两者比较差异无统计学意义(P > 0.05);经80 mg/L ox-LDL处理24 h后

BMSC-SMC细胞迁移的数目显著增多

与未处理BMSC-SMC比较

差异具有统计学意义(P < 0.01)65377;【结论】 ①经条件培养基诱导培养后

骨髓干细胞表达平滑肌特异性标志物

SMα-SMC和SM-MHC1

提示骨髓干细胞能成功分化成平滑肌细胞65377;②骨髓干细胞诱导成平滑肌细胞后

具有血管平滑肌细胞的一些生物学特征

如增殖能力和分泌胞外基质能力

同时保留了骨髓干细胞的一些生物学特征

如高迁移能力

为其在促动脉粥样硬化因素作用下

跨内皮细胞层和增殖的平滑肌细胞层迁移创造了有利的条件65377;