小鼠 T-bet 基因重组腺病毒载体的构建

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小鼠 T-bet 基因重组腺病毒载体的构建

更新时间：2023-12-12

- 小鼠 T-bet 基因重组腺病毒载体的构建
- Construction of Murine T-bet cDNA Recombinant Adenovirus Vector and Its Identification
- 中山大学学报（医学科学版） 2004年25卷第6期
- 作者机构：
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  中图分类号：
- 网络首发：2004-11-20，
  
  纸质出版：2004
- 稿件说明：
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小鼠 T-bet 基因重组腺病毒载体的构建[J]. 中山大学学报（医学科学版）, 2004,25(6).

Construction of Murine T-bet cDNA Recombinant Adenovirus Vector and Its Identification[J]. Journal of Sun Yat-sen University (Medical Sciences), 2004, 25(6).
小鼠 T-bet 基因重组腺病毒载体的构建[J]. 中山大学学报（医学科学版）, 2004,25(6). DOI：

Construction of Murine T-bet cDNA Recombinant Adenovirus Vector and Its Identification[J]. Journal of Sun Yat-sen University (Medical Sciences), 2004, 25(6). DOI：

【目的】构建小鼠T-bet基因重组腺病毒载体

为T-bet基因在支气管哮喘治疗中的作用研究提供有效的T-bet生物表达系统。【方法】采用内切酶从质粒T-bet/GFP-RV中切获约1.7kb的小鼠T-betcDNA片段

与穿梭质粒pShuttle连接

再通过稀有酶切位点将含T-betcDNA的表达盒与Adeno-X腺病毒载体骨架连接

构建重组载体pAdeno-T-bet

测序鉴定无错配及插入移位等DNA顺序改变

并转染HEK293细胞

出现CPE后取含病毒上清的细胞培养液抽提病毒DNA行PCR鉴定。【结果】PCR及酶切证实:T-betcDNA正确克隆到穿梭质粒pShuttle中

带T-betcDNA的表达盒成功重组到腺病毒载体基因组E1A缺失区

并在HEK293细胞中成功包装出具有感染活性的重组腺病毒pAdeno-T-bet。【结论】本实验成功构建了小鼠T-bet基因重组腺病毒载体

并在HEK293细胞中成功包装出重组腺病毒。

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