慢病毒介导靶向PRL-3 基因的siRNA  抑制肝癌细胞的侵袭性

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慢病毒介导靶向PRL-3 基因的siRNA 抑制肝癌细胞的侵袭性

更新时间：2023-12-12

- 慢病毒介导靶向PRL-3 基因的siRNA 抑制肝癌细胞的侵袭性
- Lentiviral-mediated siRNA against PRL-3 Suppresses Invasion Potency of Human Hepatocellular Carcinoma Cells
- 中山大学学报（医学科学版） 2010年31卷第3期
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：
  中图分类号： R735.7
- 网络首发：2010-05-20，
  
  纸质出版：2010
- 稿件说明：
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慢病毒介导靶向PRL-3 基因的siRNA 抑制肝癌细胞的侵袭性[J]. 中山大学学报（医学科学版）, 2010,31(3).

Lentiviral-mediated siRNA against PRL-3 Suppresses Invasion Potency of Human Hepatocellular Carcinoma Cells[J]. Journal of Sun Yat-sen University (Medical Sciences), 2010, 31(3).
慢病毒介导靶向PRL-3 基因的siRNA 抑制肝癌细胞的侵袭性[J]. 中山大学学报（医学科学版）, 2010,31(3). DOI：

Lentiviral-mediated siRNA against PRL-3 Suppresses Invasion Potency of Human Hepatocellular Carcinoma Cells[J]. Journal of Sun Yat-sen University (Medical Sciences), 2010, 31(3). DOI：

【目的】探讨肝再生磷酸酶-3(PRL-3)的表达对肝癌细胞侵袭能力的影响65377;【方法】设计65380;合成4对针对PRL-3 基因siRNA 的寡核苷酸序列

分别构建质粒

转染293T 细胞

据其对PRL-3 的抑制率

筛选最有效的PRL-3 基因RNAi 靶序列

设计并合成其siRNA 的双链DNA Oligo

与含绿色荧光蛋白(GFP)编码基因的pGCL-GFP 线性化载体连接产生重组慢病毒质粒LV-PRL3-SiRNA

并行PCR 和测序鉴定65377;将LV-PRL3-SiRNA

pHelper 1.0 和pHelper 2.0三种质粒DNA共转染293T细胞

包装产生慢病毒

以293T细胞GFP蛋白的表达水平经孔稀释法测定病毒滴度65377;重组慢病毒感染肝癌SMCC7721 细胞

行real time-PCR和western-blot验证PRL-3基因的沉默效果65377;用Transwell侵袭试验检测SMCC7721细胞体外侵袭力的改变65377;【结果】成功构建PRL-3 基因RNA干扰慢病毒载体并获得相应的慢病毒

浓缩病毒悬液的滴度为6 × 108 Tu/mL65377;和对照组相比

RNA 干扰组SMMC7721 细胞PRL-3 基因的mRNA 水平和蛋白水平的抑制率分别为75%和63%;其穿过人工基底膜的平均数(14.2 ± 0.8)明显少于空白对照组(33.0 ± 1.6)及非特异性siRNA感染组(31.2 ± 0.8)

侵袭抑制率为58% (P < 0.01)65377;【结论】降低PRL-3 的表达可抑制肝癌细胞的侵袭能力65377;

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