没食子酸对卡介苗感染巨噬细胞的免疫调控

何树梅; 倪书奕; 徐梦圆; 赵庆晓

doi:10.11714/jsysu.med.YX20260089

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没食子酸对卡介苗感染巨噬细胞的免疫调控

基础研究 | 更新时间：2026-09-24

- 没食子酸对卡介苗感染巨噬细胞的免疫调控
- Immunoregulatory Effects of Gallic Acid on BCG-infected Macrophages
- 中山大学学报（医学科学版） 2026年47卷第5期页码：843-856
- 作者机构：
  
  西藏民族大学藏药检测技术教育部工程研究中心//西藏自治区高原病分子遗传机制与干预研究重点实验室//高原环境与疾病相关基因研究高校重点实验室，西藏民族大学医学院，陕西咸阳 712082
- 作者简介：
  
  HE Shumei； E-mail： 573447802@qq.com
- 基金信息：
  
  西藏民族大学科研项目(23MDY01);西藏自治区自然科学基金［XZ2019ZR G-37（z）］;研究生科研创新与实践项目(Y2016186)
- DOI：10.11714/jsysu.med.YX20260089
  中图分类号： R378;R392
- 收稿：2026-06-20，
  
  修回：2026-08-30，
  
  录用：2026-09-06，
  
  纸质出版：2026-09-20
- 稿件说明：
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何树梅,倪书奕,徐梦圆等.没食子酸对卡介苗感染巨噬细胞的免疫调控[J].中山大学学报（医学科学版）,2026,47(05):843-856.

HE Shumei,NI Shuyi,XU Mengyuan,et al.Immunoregulatory Effects of Gallic Acid on BCG-infected Macrophages[J].Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences),2026,47(05):843-856.
何树梅,倪书奕,徐梦圆等.没食子酸对卡介苗感染巨噬细胞的免疫调控[J].中山大学学报（医学科学版）,2026,47(05):843-856. DOI： 10.11714/jsysu.med.YX20260089.

HE Shumei,NI Shuyi,XU Mengyuan,et al.Immunoregulatory Effects of Gallic Acid on BCG-infected Macrophages[J].Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences),2026,47(05):843-856. DOI： 10.11714/jsysu.med.YX20260089.

摘要

目的

探讨没食子酸（GA）在卡介苗（BCG）感染巨噬细胞中的宿主免疫调控作用及其分子机制，为结核分枝杆菌的宿主导向抗结核研究提供实验依据。

方法

采用刃天青显色法测定GA对BCG的最低抑菌浓度（MIC），结合细菌生长曲线、MTT比色法评价GA对BCG增殖及侵袭能力的影响。构建BCG感染RAW264.7巨噬细胞模型，设置感染对照组（Ctrl）、异烟肼（INH）组及GA低、中、高剂量组。采用流式细胞术联合细菌铺板计数检测胞内BCG存活；AnnexinV-APC/7-AAD 双染法检测细胞凋亡，qRT-PCR检测凋亡相关基因

Caspase-3

、

Bcl-2

mRNA表达；流式细胞术检测巨噬细胞极化表型；DHE探针检测胞内活性氧（ROS）；Griess法检测上清一氧化氮（NO）；ELISA检测上清TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-10细胞因子水平。

结果

GA对BCG的MIC为1 250 μmol/L，可浓度依赖性抑制BCG增殖与侵袭（

＜0.05）；选择20、40、80 μmol/L的药物安全浓度开展细胞实验，GA预处理36 h可显著降低胞内BCG菌载量（

＜0.05）。GA双向调控巨噬细胞凋亡，感染早期抑制凋亡、后期促进凋亡；感染早期诱导 M1极化，感染后期促进M2极化（

＜0.05）；同时降低胞内ROS与NO水平，下调促炎因子分泌、上调抗炎因子IL-10分泌（

＜0.05）。

结论

GA体外可抑制BCG增殖侵袭；并通过双向调控巨噬细胞凋亡与极化、发挥抗氧化抗炎效应，改善宿主免疫微环境，具备宿主导向抗分枝杆菌的潜在价值。

Abstract

Objective

To explore the host immunomodulatory effect and its molecular mechanism of gallic acid （GA） in

Bacillus Calmette-Guérin

（BCG） infected macrophages， and to provide experimental evidence for host-directed anti-tuberculosis research against

Mycobacterium tuberculosis

（Mtb）.

Methods

The minimum inhibitory concentration （MIC） of GA against BCG was determined by resazurin colorimetric assay. Bacterial growth-curve test and MTT colorimetric assay were used to evaluate the effects of GA on BCG proliferation and invasion. A BCG-infected RAW264.7 macrophage model was established， including infection control group （Ctrl）， isoniazid （INH） group， and low-， medium- and high-dose GA groups. Flow cytometry combined with colony-plate counting was performed to detect intracellular BCG survival. Cell apoptosis was measured by Annexin V-APC/7-AAD double staining， and qRT-PCR was used to detect the mRNA expression of apoptosis-related genes

Caspase-3

and

Bcl-2

. Macrophage polarization phenotypes were analyzed by flow cytometry. Intracellular reactive oxygen species （ROS） were detected using DHE fluorescent probe. The Griess assay was applied to determine supernatant nitric oxide （NO） concentration. ELISA was used to detect the levels of TNF-α， IFN-γ， IL-6 and IL-10 in cell culture supernatant.

Results

The MIC of GA against BCG was 1 250 μmol/L. GA inhibited BCG proliferation and invasion in a concentration-dependent manner （

＜0.05）. Safe concentrations of 20， 40 and 80 μmol/L were selected for subsequent cellular experiments. Thirty-six-hour GA pretreatment markedly reduced the intracellular BCG bacterial load （

＜0.05）. GA exerted bidirectional reg

ulation on macrophage apoptosis： it inhibited apoptosis at the early-stage infection and promoted apoptosis at the late-stage infection. GA induced M1-type polarization in early infection and facilitated M2-type polarization in late infection （

＜0.05）. Meanwhile， GA decreased intracellular ROS and NO levels， down-regulated the secretion of pro-inflammatory cytokines and up-regulated the secretion of anti-inflammatory cytokine IL-10 （

＜0.05）.

Conclusion

GA inhibits BCG proliferation and invasion in vitro. It remodels host immune microenvironment via bidirectional regulation of macrophage apoptosis and polarization as well as anti-oxidative and anti-inflammatory effects， showing potential value for host-directed anti-mycobacterial therapy.

关键词

Keywords

references

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